【摘 要】 目的 探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者免疫功能失调机制。方法 微量淋巴细胞毒法。在狼疮活动期和缓解期分别查抗淋巴细胞抗体(ALA)、淋巴细胞形态及计数。结果 23例SLE患者活动期有20例ALA阳性伴淋巴细胞肿胀变性、胞膜毛糙失去折光性,占86.9%,淋巴细胞计数为(1.5±0.6)×109/L而经激素治疗病情缓解后ALA阳性且淋巴细胞肿胀变性者仅9例,占39.1%,淋巴细胞计数上升为(3.5±1.0)×109/L。前后比较差异有显著性(P<0.01)。结论 SLE患者活动期体内存在ALA并导致淋巴细胞变性,细胞数目减少,免疫功能失调。激素治疗可逆转上述病理变化。
Immunologic regulation disorder and changes of anti-lymphocyte antibody in patients with systemic lupus erythematosus
【Abstract】 Objective To investigate the mechanism of immunologic maladjustment in patients with systemic lupus erythematosus (SLE).Methods Anti-lymphocyte antibody (ALA),lymphocytic shape and count were studied respectively in active and remissive SLE by the technique of microlymphocytotoxicity.Results Positive ALA with degenerative lymphocyte swelling resulted in losing dioptre was 86.9% (20/23) in active SLE and 39.1% (9/23) in remissive SLE which underwent cortisone.Lymphocytic count increased from (1.5±0.6)×109/L to (3.5±1.0)×109/L.There was a significant difference (P<0.01) between both.Conclusion Positive rate of ALA in active SLE is higher than that in remissive SLE.Lymphocytic degeneration and lymphocytopenia result in immunologic regulation disorder.These pathological changes can be im proved by cortisone.
【Key words】 Lupus erythematosus,systemic; Anti-lymphocyte serum; Immunity,cellular
为探讨系统性红斑狼疮患者免疫功能失调机制,我们对23例SLE患者进行了抗淋巴细胞抗体(ALA)、淋巴细胞形态及计数检测,报告如下。
1 资料与方法
1.1 病例选择
23例SLE患者均为住院病人,其中男2例,女21例,年龄14~54岁,平均(32±11)岁。23例均符合1982年美国风湿病学会修订的SLE分类标准。55名健康成人体检者为正常对照组。
1.2 抗淋巴细胞抗体检查
采用微量淋巴细胞毒法。
标准抗淋巴细胞抗血清及正常人AB混合血清、兔补体均为军事科学院307医院免疫室提供。
1.2.1 淋巴细胞分离及计数:①抽静脉血3 ml入装有毛玻璃球的三角烧瓶内摇动10 min,去纤维蛋白及血小板,然后加Hanks液6 ml。②再加入有淋巴细胞分离液的试管中离心10 min,分离淋巴细胞。③将分离出的淋巴细胞再以Hanks液离心洗涤3次进行计数,最后以Hanks液再调至含2×109/L的淋巴细胞悬液待检。
1.2.2 抽患者静脉血2 ml分离血清待检。
1.2.3 抗淋巴细胞抗体检测步骤:用塑制免疫反应板,每孔依次加入液体石蜡5 μl,患者血清1 μl,正常人淋巴细胞悬液1 μl,置20 ℃温箱30 min,再加新鲜兔补体5 μl置温箱60 min,然后加伊红-Y 2.5 μl染色3~5 min,再以37%甲醛3 μl固定5 h以上。每孔平行检测3次,最后在相位差显微镜下观察结果。
1.2.4 对照:①阳性对照,上述反应孔内加入标准抗淋巴细胞抗血清1 μl。②阴性对照,上述反应孔内加入正常男性标准AB混合血清1 μl。方法步骤同前。
1.3 患者淋巴细胞形态变化检查
免疫反应孔内加入正常男性标准AB混合血清1 μl,患者淋巴细胞悬液1 μl。方法步骤及对照同抗淋巴细胞抗体检查。
1.4 判断标准
1.4.1 阴性:在相位差显微镜下,反应孔内的淋巴细胞呈淡红色,细胞膜光整而且折光性很强。
1.4.2 阳性:反应孔内淋巴细胞为60%~100%。肿胀变性,大而扁平、暗淡,胞膜毛糙失去折光性。
1.5 SLE患者治疗
强的松按0.8~1.5mg·kg-1.d-1,4~8周,病情缓解后递减。
2 结 果
正常对照组55例抗淋巴细胞抗体全部阴性,淋巴细胞计数为(2.8±1.2)×109/L。淋巴细胞形态均为正常。
23例SLE患者活动期ALA阳性伴淋巴细胞肿胀变性,失去折光性者20例,其阳性率86.9%,淋巴细胞计数(1.5±0.6)×109/L,经激素治疗临床症状缓解后ALA阳性并淋巴细胞肿胀变性者为9例,其阳性率为39.1%,淋巴细胞计数上升为(3.5±1.0)×109/L。治疗前后各项比较差异显著(P<0.01)。
3 讨 论
本研究发现,86.9%的SLE患者在活动期血中存在ALA,并使淋巴细胞数 量减少。细胞肿胀、胞膜毛糙,失去折光性。Morimoto发现,SLE患者血清能够与大约20%~70%的正常个体的T淋巴细胞起反应,而不与Ig+的B淋巴细胞作用;ALA阳性的病人外周T淋巴细胞比ALA阴性者降低25%,说明血清中的ALA主要与T淋巴细胞数目变化有直接关系[1]。也是导致免疫功能失调的原因之一[2]。这样一旦出现ALA,抑制性T细胞,数量减少而辅助性T细胞及B细胞功能相对增强,遂产生大量自身抗体,造成多系统损伤。本文资料证实,激素治疗可使大部分SLE患者ALA转阴,淋巴细胞数量和形态恢复正常。
参 考 文 献
1,范雪莉.SLE的外周血淋巴细胞亚群变化和抗淋巴细胞抗体.中国皮肤性病杂志,1990,4:117.
2,徐文玉.SLE免疫调节功能紊乱的机制T细胞亚群失衡和抗淋巴细胞抗体的作用.上海免疫学杂志,1992,12:253.